為探究秦川牛宰后成熟期間基礎(chǔ)免疫球蛋白(basigin,BSG)對絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)信號通路及細(xì)胞凋亡的影響,利用4D-非標(biāo)記定量組學(xué)技術(shù)分析BSG及其差異蛋白的變化情況。向宰后秦川牛肉的背最長肌中注射BSG抑制劑衣霉素,通過蛋白質(zhì)免疫印跡法測定秦川牛肉在4 ℃貯藏過程中MAPK通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)表達(dá)水平,并測定caspase-3的活力變化。研究表明:在秦川牛宰后貯藏期內(nèi),BSG的表達(dá)量總體呈先上升后下降趨勢;利用京都基因與基因組百科全書通路分析發(fā)現(xiàn)BSG及其差異蛋白質(zhì)顯著注釋于氧化磷酸化通路、鈣信號通路、MAPK信號通路,說明BSG通過MAPK途徑發(fā)揮作用。另外,衣霉素組MAPK通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)的相對表達(dá)量均顯著下調(diào),說明BSG抑制劑使得MAPK信號通路失活。這為研究BSG對MAPK信號通路影響奠定了很好的基礎(chǔ)。在抑制BSG的表達(dá)后,衣霉素組caspase-3的活力明顯上升,說明細(xì)胞凋亡是細(xì)胞損傷機(jī)制的重要環(huán)節(jié),衣霉素作用于BSG的N端結(jié)構(gòu)使蛋白質(zhì)發(fā)生去糖基化作用。通過抑制細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的折疊使其生物學(xué)活性受到抑制,從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
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