通過優(yōu)化色譜條件和樣品前處理?xiàng)l件,建立測定發(fā)酵乳中甜菊糖苷(包括甜菊苷、瑞鮑迪苷A、瑞鮑迪苷B、瑞鮑迪苷C、瑞鮑迪苷F、杜克苷A、甜茶苷及甜菊雙糖苷)的高效液相色譜法,并進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證。用水提取發(fā)酵乳中甜菊糖苷,45 ℃水浴超聲提取20 min,再加入30%的乙腈繼續(xù)在45 ℃水浴超聲提取10 min,亞鐵氰化鉀-乙酸鋅沉淀劑沉淀蛋白,C18柱分離,磷酸鈉緩沖液和乙腈梯度洗脫,紫外檢測器在210 nm波長處檢測。結(jié)果表明:本方法在1~50 μg/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系,方法檢出限(RS/N=3)為3.0 mg/kg,定量限(RS/N=10)為10.0 mg/kg;當(dāng)甜菊糖苷的添加量在15~200 mg/kg時(shí),加標(biāo)回收率為92.0%~103.1%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3.0%。該方法具有快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),可用于發(fā)酵乳中甜菊糖苷含量的檢測。
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