為了探究NO介導(dǎo)的宰后成熟期間灘羊肉線粒體通路細(xì)胞凋亡對(duì)嫩度的影響。用0.8%生理鹽水(對(duì)照組)、20 mmol/L氨基胍鹽酸鹽(aminoguanidine hydrochloride,AH)(AH組)和90 mmol/L L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)(L-Arg組)注射處理灘羊后腿肌,分析在4 ℃條件下成熟0、6、12、24、48、96、192 h時(shí),NO及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sythase,iNOS)含量、胞漿細(xì)胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)氧化還原狀態(tài)、氧化應(yīng)激水平以及線粒體細(xì)胞凋亡途徑和嫩度等相關(guān)指標(biāo)變化情況。結(jié)果表明:宰后12~24 h,L-Arg組NO含量和iNOS含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而ATP含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05);24~48 h,AH組胞漿Cyt-c還原水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性顯著高于對(duì)照組,而同一時(shí)間活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平則顯著低于對(duì)照組(P<0.05);12~96 h,L-Arg組ATP含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05),在24 h時(shí)其Ca2+質(zhì)量濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。除了24 h以外,整個(gè)成熟過程其他成熟時(shí)間L-Arg組的Caspase-3活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);此外,整個(gè)宰后成熟期間L-Arg組的Bax/Bcl-2比值、pH值以及肌原纖維小片化指數(shù)(myofibril fragmentation index,MFI)均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);相反,L-Arg組剪切力均低于對(duì)照組,AH組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。綜上,NO在灘羊宰后成熟過程中通過加劇線粒體氧化應(yīng)激,直接上調(diào)ROS水平,使得SOD活性降低,線粒體膜轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)呈不可逆開放狀態(tài),致使線粒體損傷;通過控制胞漿Cyt-c氧化還原狀態(tài),間接激活Caspase-3活性加速細(xì)胞凋亡能量代謝,消耗ATP以維持肌細(xì)胞穩(wěn)態(tài);通過影響Ca2+釋放,上調(diào)Bax/Bcl-2比值,誘導(dǎo)線粒體通路細(xì)胞凋亡的級(jí)聯(lián)反應(yīng)發(fā)生,最終引起MFI增大和剪切力降低,從而改善灘羊肉的嫩度。
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