為更充分了解納豆中的成分對(duì)脾細(xì)胞增殖能力的影響,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)DEAE-52纖維素離子交換柱層析以及Sephadex G-100凝膠柱層析,從納豆糖蛋白粗提物中獲得兩種較純的納豆糖蛋白:NPPC-1-b和NPPC-2-a。由高效凝膠滲透色譜得到它們的分子質(zhì)量分別為26.93、357.60 kD。對(duì)這兩種糖蛋白進(jìn)行進(jìn)一步的紅外光譜掃描、紫外光譜掃描、單糖組成分析以及氨基酸組成分析顯示,NPPC-1-b中含有的是O-糖肽鍵,而NPPC-2-a中存在的是N-糖肽鍵。NPPC-1-b主要由甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖組成,且其含量比例分別為67.45%、25.67%和2.44%。NPPC-2-a主要由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖以及半乳糖組成,其含量比例分別為36.64%、21.71%、10.35%、9.00%和5.17%。氨基酸自動(dòng)分析結(jié)果顯示,兩種糖蛋白兼含有人體所需的17 種氨基酸。NPPC-1-b主要由谷氨酸、脯氨酸、賴氨酸和精氨酸組成,其含量分別為0.971%、0.791%、0.708%和0.603%;NPPC-2-a主要由谷氨酸、脯氨酸以及天冬氨酸組成,其含量分別為0.903%、0.689%和0.504%。此外,體外免疫活性探討發(fā)現(xiàn),100~200 μg/mL的NPPC-1-b以及12.5~200 μg/mL的NPPC-2-a可顯著增強(qiáng)脾細(xì)胞增殖能力(P<0.05),其中以100 μg/mL的NPPC-2-a作用效果最佳。在細(xì)胞因子表達(dá)方面, NPPC-1-b和NPPC-2-a可顯著促進(jìn)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-2(interleukin-2,IL-2)以及干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的表達(dá),其中50 μg/mL的NPPC-2-a分泌IL-2最多,200 μg/mL的NPPC-2-a表達(dá)IFN-γ的量最高。以上研究結(jié)果表明NPPC-1-b和NPPC-2-a具有一定的免疫調(diào)節(jié)作用。
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