以水解度為指標(biāo),優(yōu)化了中性蛋白酶酶解雞胸軟骨Ⅱ型膠原的條件,在此基礎(chǔ)上制備不同水解度Ⅱ型膠原酶解復(fù)合物,并以淋巴細(xì)胞增殖率為指標(biāo)對其免疫活性進(jìn)行研究。結(jié)果表明,中性蛋白酶的酶解能力最強(qiáng),其最佳酶解條件為:酶解溫度50 ℃、pH 7.5、底物質(zhì)量濃度25 mg/mL、加酶量40 U/mg、酶解時間150 min。當(dāng)Ⅱ型膠原在水解度為18%時,其對淋巴細(xì)胞的增殖活性達(dá)到58.69%。Ⅱ型膠原酶解復(fù)合物的質(zhì)量濃度對淋巴細(xì)胞的增殖率也有顯著影響,當(dāng)其質(zhì)量濃度達(dá)到1 mg/mL時,對淋巴細(xì)胞增殖能力達(dá)到最大。免疫活性較高的Ⅱ型膠原酶解復(fù)合物的分子質(zhì)量主要分布于1 000~180 D范圍內(nèi),占其總含量的75.21%。
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