為探索植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)NDC75017產(chǎn)γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的影響因素及相關(guān)代謝機(jī)制,首先采用響應(yīng)面法,對(duì)菌體積累GABA的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。其次,分別采用高效液相色譜和實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time reverse transcript polymerase chain reaction)測(cè)定了不同時(shí)間點(diǎn)GABA產(chǎn)量和谷氨酸脫羧酶(glutamic acid decarboxylase,GAD)編碼基因gadB的相對(duì)表達(dá)量。L. plantarum NDC75017發(fā)酵過程中產(chǎn)GABA的最佳底物(谷氨酸鈉)、輔酶(5’-磷酸吡哆醛)的添加量和發(fā)酵初始pH值分別為68.03 mmol/L、20.92 μmol/L和4.65。底物與輔酶之間、輔酶與發(fā)酵初始pH值之間的交互作用能夠顯著地影響GABA的積累(P<0.05)。發(fā)酵48 h內(nèi),基因gadB表達(dá)量呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì),與GABA產(chǎn)量的變化趨勢(shì)并不完全一致。上述結(jié)果表明:底物、輔酶和發(fā)酵初始pH值以及它們之間的交互作用是影響L. plantarumNDC75017產(chǎn)生GABA的關(guān)鍵因素。同時(shí)GABA的積累不僅受到GAD和gadB的影響,其他與GABA支路(GABAshunt)相關(guān)的酶和基因也參與了GABA的代謝。
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