領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為使大豆錳超氧化物歧化酶（Mn superoxide dismutase，MnSOD）在乳酸乳球菌中高效表達(dá)，將克隆的MnSOD基因開(kāi)放閱讀框序列分別重組到質(zhì)粒pNZ8149和經(jīng)改造的質(zhì)粒pNZS上，表達(dá)載體pNZ-SOD和分泌表達(dá)載體pNZS-SOD，將兩者分別以電穿孔法轉(zhuǎn)化乳酸乳球菌L. lactis NZ3900，經(jīng)Elliker瓊脂板篩選、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）、酶切鑒定正確后，獲得的兩重組菌株加入Nisin進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)，對(duì)L. lactisNZ3900/pNZ-SOD和L. lactis NZ3900/pNZS-SOD的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodiumdodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和酶活性對(duì)比分析。結(jié)果顯示：L. lactis NZ3900/pNZS-SOD菌株表達(dá)SOD總活性約是L. lactis NZ3900/pNZ-SOD菌株的1.6 倍，是L. lactis NZ3900/pNZ8149的13.5倍，且可將表達(dá)的約2/3的SOD分泌到胞外，表明經(jīng)改造的乳酸菌分泌表達(dá)系統(tǒng)L. lactis NZ3900/pNZS能夠分泌表達(dá)SOD，并增強(qiáng)SOD的表達(dá)。
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