測定紫甘薯花色素與胰蛋白酶反應前后酶的催化活性、催化反應動力學并采用紫外光譜法、熒光光譜法和紅外光譜法研究紫甘薯花色素與胰蛋白酶相互作用特性。結果表明:紫甘薯花色素對胰蛋白酶催化活性有明顯的抑制作用,抑制類型為可逆的競爭性抑制,抑制常數(shù)Ki=6.16×10-4 mmol/L,當紫甘薯花色素與胰蛋白酶的物質(zhì)的量比為140∶1,在 37 ℃反應 15 min,抑制率達到38.61%,而反應時間對催化活性的影響不明顯;紫甘薯花色素可使胰蛋白酶的內(nèi)源熒光猝滅,猝滅類型為靜態(tài)猝滅,室溫下猝滅常數(shù)Kq為1.73×1012 L/(mol·s),結合常數(shù)KA為3.88×104 L/mol,結合位點數(shù)n為0.86;熱力學參數(shù)確定兩者之間的作用力主要為氫鍵和范德華力;根據(jù)F?rster能量轉(zhuǎn)移理論得出它們的結合距離為3.56 nm;紅外光譜經(jīng)過去卷積、二階導數(shù)處理得知與紫甘薯花色素作用后胰蛋白酶的α-螺旋含量降低,β-折疊含量升高。
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