以輪臺小白杏(甜杏仁品種)和甲麥黃杏(苦杏仁品種)為實驗材料,采用同源基因克隆方法克隆野黑櫻苷水解酶(prunasin hydrolase,PH)基因。輪臺小白杏PH基因命名為PaLTPh(GenBank登錄號:KF888615),序列長度3 686 bp;甲麥黃杏PH基因命名為PaMJPh(KF888616),序列長度3 690 bp。PaLTPh和PaMJPh與扁桃Ph691基因相似性為94%。根據(jù)PaLTPh和PaMJPh保守區(qū)序列設(shè)計引物,克隆編碼區(qū)(coding sequence,CDS)序列。PaLTPh CDS(KF888617)和PaMJPh CDS(KF888618)序列長度均為1 635 bp,與扁桃Ph691全CDS區(qū)相似性為97%。PaLTPh CDS和PaMJPh CDS序列均為全長的開放閱讀框,編碼蛋白質(zhì)長度為544 個氨基酸。PaLTPH蛋白和PaMJPH蛋白均包含長度為26 個氨基酸的信號肽和糖基水解酶家族Ⅰ結(jié)構(gòu)域,可催化野黑櫻苷水解為扁桃腈和葡萄糖。杏PH基因與扁桃Ph691具有高度的同源性。
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