以硅膠為載體,制備α-淀粉酶親和色譜柱,以線掃循環(huán)伏安法為檢測(cè)方法,評(píng)價(jià)知母提取物的α-淀粉酶抑制活性。首先考察固定化條件對(duì)固定化酶的影響以及親和色譜柱的穩(wěn)定性。其次利用前沿親和色譜檢測(cè)5 種知母糖苷類化合物(新芒果苷、芒果苷、知母皂苷AⅡ、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ)的α-淀粉酶親和力。最后檢測(cè)化合物的α-淀粉酶抑制活性。結(jié)果表明5 種化合物的α-淀粉酶結(jié)合力大小排序?yàn)椋盒旅⒐眨↘d=0.230 5 μmol/L)>芒果苷(Kd=0.299 5 μmol/L)>知母皂苷BⅡ(Kd=0.312 4 μmol/L)>知母皂苷BⅢ (Kd=0.316 2 μmol/L)>知母皂苷AⅡ(Kd=0.453 3 μmol/L),其排序結(jié)果與樣品的α-淀粉酶抑制活性一致。說(shuō)明前沿親和色譜可以用來(lái)定量檢測(cè)化合物的α-淀粉酶抑制活性,且可根據(jù)親和力的大小將化合物的抑制活性進(jìn)行排序。
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