目的:提取α-1,3-葡聚糖并獲得系列α-1,3-葡聚寡糖。方法:以香菇子實體粗提粉為原材料,依次經(jīng)生理鹽水(0.9% NaCl)和水溶解提取,然后用質(zhì)量分數(shù)5% NaOH和質(zhì)量分數(shù)0.05% NaBH4溶解,調(diào)節(jié)pH值至中性再分離提取的分級沉淀策略,獲得了依次命名為LFⅠ、LFⅡ、LFⅣ、PⅢ和PⅣ的5 個不同組分,再利用紅外光譜(infrared spectroscopy,IR)和核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)對PⅣ結(jié)構(gòu)進行鑒定,然后利用酸解法對PⅣ進行寡聚化,并利用常壓色譜Bio-Gel P4柱進行分離,同時對每個組分利用基質(zhì)輔助激光解吸-電離質(zhì)譜(matrix assisted laser desorption ionization mass spectrometry,MALDI-MS)或電噴霧離子化質(zhì)譜法(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)進行表征。結(jié)果:結(jié)構(gòu)分析表明PⅣ為線性α-1,3-葡聚糖,10 mmol/L三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)中,100 ℃處理2 h為較佳的水解條件,經(jīng)過Bio-Gel P4柱分離獲得的各個組分被依次鑒定為α-1,3-2~α-1,3-13糖。結(jié)論:實現(xiàn)α-1,3-葡聚糖的分級精制與結(jié)構(gòu)鑒定,成功獲得結(jié)構(gòu)確定的系列α-1,3-葡聚寡糖。
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