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應(yīng)用多重PCR-液相懸浮芯片技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻品系
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 155 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 黃文勝,傅 凱,鄧婷婷,李富威,劉 昊,陳 穎
關(guān)鍵詞: 多重PCR;液相芯片;轉(zhuǎn)基因水稻;檢測(cè)
摘要:

開(kāi)展轉(zhuǎn)基因水稻的多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)液相芯片檢測(cè)方法研究。針對(duì)科豐6號(hào)(KF6)、科豐8號(hào)(KF8)、華恢1號(hào)(BT63)、克螟稻(KMD1)、M12、T1C-19、T2A-1、LL62和LL601九種轉(zhuǎn)基因水稻的側(cè)翼序列,設(shè)計(jì)合成了在生物素標(biāo)記的多重PCR擴(kuò)增引物與固定在熒光編碼微球上的探針,建立了2 個(gè)多重PCR-液相芯片檢測(cè)體系,可同時(shí)檢測(cè)出這9 種轉(zhuǎn)基因水稻成分。結(jié)果表明,9 種轉(zhuǎn)基因水稻的引物和探針都具有較高的特異性,各組引物/探針之間無(wú)交叉擴(kuò)增和非特異雜交,且在多重PCR-液相芯片檢測(cè)中9 種轉(zhuǎn)基因水稻品系的相對(duì)檢測(cè)靈敏度達(dá)到0.1%水平,符合歐盟和其他國(guó)家有關(guān)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品標(biāo)識(shí)的要求。本方法的檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性均高于傳統(tǒng)方法,可作為進(jìn)出口轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品和國(guó)內(nèi)轉(zhuǎn)基因檢測(cè)的有效方法。

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