以植物乳桿菌KLDS1.0320候選表面黏附蛋白NP_785232 N端前兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成的融合表達(dá)蛋白為研究對(duì)象,采用體外模擬腸道環(huán)境的方法研究其對(duì)大腸桿菌DH5α黏附豬腸黏液的排除抑制作用。對(duì)豬腸黏液進(jìn)行固定,加入His-N2融合表達(dá)蛋白37 ℃孵育1 h,再加入大腸桿菌DH5α菌懸液37 ℃孵育1 h,洗去未黏附的菌體,之后用1%Triton X-100進(jìn)行裂解,將裂解液涂布LB瓊脂平板以進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。結(jié)果表明:pH值為6.6 時(shí),相對(duì)于緩沖液陰性對(duì)照組,His-N2蛋白對(duì)大腸桿菌DH5α黏附豬腸黏液的抑制率為(50.37±3.66)%,相對(duì)于BSA蛋白對(duì)照組的抑制率為(38.33±4.55)%;pH值為7.5時(shí),相對(duì)于緩沖液陰性對(duì)照組,His-N2蛋白對(duì)大腸桿菌DH5α黏附豬腸黏液的抑制率為(42.18±3.44)%,相對(duì)于BSA蛋白對(duì)照組的抑制率為(34.48±3.90)%。在體外模擬條件下,由植物乳桿菌KLDS1.0320的候選表面黏附蛋白NP_785232 N端前兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成的His-N2蛋白能排除抑制大腸桿菌DH5α對(duì)豬腸黏液蛋白的黏附。
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