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限制性內(nèi)切酶酶切確證河豚魚成分PCR檢測結(jié)果
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 168 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 曲良苗,陳文炳,繆婷玉,邵碧英,彭 娟,江樹勛
關(guān)鍵詞: 河豚魚;PCR檢測;限制性內(nèi)切酶;DNA測序;結(jié)果確證
摘要:

動植物成分的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)檢測往往出現(xiàn)假陽性結(jié)果,為了有效排 除河豚魚成分檢測中出現(xiàn)的假陽性現(xiàn)象,提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)用河豚魚PCR檢測引物進(jìn)行河豚魚成分的PCR 檢測與限制性內(nèi)切酶NmeA Ⅲ酶切確證實(shí)驗(yàn)。18 個供試樣品中3 個樣品無PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,判為陰性結(jié)果,15 個樣品 初步判為疑似陽性。應(yīng)用限制性內(nèi)切酶NmeA Ⅲ對疑似陽性樣品的PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切與電泳分析,電泳圖譜與河豚 魚陽性對照不同的2 個樣品,判定為假陽性結(jié)果,電泳圖譜與陽性對照相同的4 個未知學(xué)名的河豚魚加工樣品,確 證為陽性結(jié)果,即檢出河豚魚成分,PCR產(chǎn)物序列經(jīng)GenBank同源性序列查詢比對(BLAST)予以驗(yàn)證,建立了簡 便的河豚魚成分PCR檢測結(jié)果確證方法。

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