目的:建立實時熒光聚合酶鏈式反應檢測轉(zhuǎn)基因小麥B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鑒定方法。方 法:以轉(zhuǎn)基因小麥B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2為研究對象,在轉(zhuǎn)基因小麥外源片段與小麥染色體重組的邊界序 列分別設(shè)計引物和探針,以其他多種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品和非轉(zhuǎn)基因小麥為對照進行特異性實驗,以B73-6-1樣品模擬制備 10 個含量梯度的添加樣品進行靈敏度實驗。結(jié)果:本研究設(shè)計的引物和探針具有很好的品系鑒定特異性,檢測靈敏 度可達到0.01%(m/m)。結(jié)論:該方法特異性好、靈敏度高,可快速、準確地鑒定轉(zhuǎn)基因小麥B73-6-1、B72-8-11b 和B102-1-2品系。
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