目的:基于Au/SiO2信號(hào)放大,通過循環(huán)伏安法實(shí)現(xiàn)對(duì)沙門氏菌(Salmonella)的高靈敏度檢測(cè)。方法:將與沙門氏菌靶基因DNA互補(bǔ)配對(duì)的堿基序列(捕捉DNA和顯示DNA),分別修飾于導(dǎo)電玻璃電極(indium tin oxide,ITO)及Au/SiO2納米顆粒表面,構(gòu)建捕獲探針和顯示探針,當(dāng)在體系中加入沙門氏菌靶DNA后,會(huì)形成捕捉DNA-靶DNA-顯示DNA構(gòu)成的“三明治夾心”結(jié)構(gòu)。由于Au/SiO2的含量與靶DNA濃度呈正相關(guān),因此靶DNA濃度的變化可導(dǎo)致ITO峰電流值相應(yīng)變化,從而達(dá)到檢測(cè)目的。結(jié)果:在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下,檢測(cè)沙門氏菌靶DNA時(shí),濃度在10-11~10-7 mol/L范圍內(nèi)呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,線性回歸方程為y=-0.000 3x+0.000 1(R2=0.998 9),最低檢測(cè)限為6 pmol/L;檢測(cè)沙門氏菌時(shí),線性范圍為50~7 910 CFU/mL,線性回歸方程為y=-1.6×10-7x+0.003 2(R2=0.994 0),最低檢測(cè)限為35 CFU/mL。結(jié)論:經(jīng)特異性及實(shí)驗(yàn)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)證明本方法可用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。
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