研究胱硫醚γ-裂解酶基因CYS3敲除對S. cerevisiae 3-甲硫基丙醇合成代謝的影響。將編碼胱硫醚-γ-裂解酶的CYS3基因和抗性標(biāo)記基因Zeocin克隆,構(gòu)建敲除組件CYS3δ:Zeocin,醋酸鋰法將其轉(zhuǎn)化導(dǎo)入S. cerevisiae S288C表達(dá),構(gòu)建CYS3基因敲除的工程菌。結(jié)果表明:搖瓶發(fā)酵120 h時,工程菌S. cerevisiae C3和S. cerevisiae S288C的3-甲硫基丙醇生成量分別為0.60 g/L和0.94 g/L,S. cerevisiae C3較野生型S288C的3-甲硫基丙醇生成量降低36.2%。說明CYS3基因敲除對S. cerevisiae的3-甲硫基丙醇有較大影響,并呈現(xiàn)負(fù)調(diào)節(jié)作用。
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