為建立食品中開(kāi)心果過(guò)敏原成分的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)方法,根據(jù)GenBank中公布的開(kāi)心果過(guò)敏原2S種子貯存蛋白基因序列設(shè)計(jì)合成LAMP引物,篩選最佳引物并對(duì)其內(nèi)引物濃度進(jìn)行優(yōu)化。以開(kāi)心果、腰果、胡桃等堅(jiān)果類以及大米、玉米、大豆等常見(jiàn)農(nóng)產(chǎn)品驗(yàn)證該方法的特異性,將開(kāi)心果DNA進(jìn)行梯度稀釋以驗(yàn)證方法的檢測(cè)低限,并以小麥為基質(zhì)配制模擬添加樣品測(cè)試方法的相對(duì)靈敏度。結(jié)果表明:該方法能夠特異性檢測(cè)食品中的開(kāi)心果成分,對(duì)開(kāi)心果基因組DNA的檢測(cè)限為0.2ng,食品中開(kāi)心果成分相對(duì)檢測(cè)靈敏度低于0.1%(m/m),通過(guò)在反應(yīng)終產(chǎn)物中加入SYBR GreenⅠ,可用肉眼判斷檢測(cè)結(jié)果,LAMP檢測(cè)時(shí)間不超過(guò)60min。該方法快速準(zhǔn)確,不依賴復(fù)雜昂貴的檢測(cè)儀器,可應(yīng)用于過(guò)敏原開(kāi)心果成分的快速檢測(cè)。
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