采用單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面法對(duì)黑曲霉(Aspergillus niger)xj產(chǎn)纖維素酶的液體發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化并以羧甲基纖維素酶活力作為響應(yīng)值。首先通過(guò)單因素試驗(yàn)初步確定葡萄糖2g/100mL、酵母膏1g/100mL和聚乙二醇體積分?jǐn)?shù)0.1%,初始pH7.0,250mL三角瓶裝30mL液體培養(yǎng)基、接種種齡為24h、接種量10%。再利用Plackett-Burman(PB)設(shè)計(jì)篩選出影響羧甲基纖維素酶(CMCase)活力的顯著因素:接種量和碳源。通過(guò)最陡爬坡試驗(yàn)逼近最大酶活力區(qū)域。最后用中心復(fù)合設(shè)計(jì)及響應(yīng)面分析確定產(chǎn)酶的最佳發(fā)酵條件為在PDA的基礎(chǔ)上,葡萄糖2.7g/100mL、酵母膏1.25g/100mL和聚乙二醇0.1%、種齡30h、裝液量37.5mL(250mL三角瓶)、接種量8%(3.3mL)、初始pH7.0、28℃、150r/min培養(yǎng)96h。經(jīng)過(guò)優(yōu)化,CMCase活力最高為(63.5±1.7)U/mL,比未優(yōu)化的條件(在PDA的基礎(chǔ)上,種齡24h、裝液量30mL(250mL三角瓶)、接種量10%(3mL)、葡萄糖2g/100mL、初始pH7.0、28℃、150r/min培養(yǎng)96h)得到的酶活力最高值(49.0±1.7)U/mL提高了29.59%。
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