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鹽酸克倫特羅抗體純化及直接競爭ELISA方法研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 袁利鵬,盧倚群,孫遠(yuǎn)明,徐振林,雷紅濤
關(guān)鍵詞: 克倫特羅;純化;酶標(biāo)記;ELISA
摘要:

對比飽和硫酸銨法、辛酸法、辛酸-硫酸銨法和硫酸銨-DEAE-纖維素法4種純化方法對鹽酸克倫特羅抗體的純化效果,研究簡易過碘酸鈉法與3種改良過碘酸鈉法對抗體-辣根過氧化物酶標(biāo)記率的影響,基于酶標(biāo)記抗體建立快速檢測鹽酸克倫特羅的直接競爭酶聯(lián)免疫分析(ELISA)方法。結(jié)果表明:辛酸法純化抗體得率最高,但純度最差;辛酸-硫酸銨和硫酸銨-DEAE-纖維素法純化抗體得率較低,但純度最好。簡易過碘酸鈉法所獲得的抗體-酶標(biāo)記得率最高,但抗體效價偏低,改良過碘酸鈉法獲得的抗體效價明顯升高。直接競爭ELISA方法檢測鹽酸克倫特羅的最低檢測限為2.7ng/mL,尿樣加標(biāo)回收率94.2%,批內(nèi)變異系數(shù)為9.1%,批間變異系數(shù)為13.8%,與其他結(jié)構(gòu)類似物無明顯交叉反應(yīng)。該方法具有操作簡便、步驟少、靈敏度高、特異性更好等特點(diǎn),可進(jìn)一步在克倫特羅的監(jiān)測中發(fā)揮重要作用。

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