以保藏的黑曲霉菌種作為菌源,利用黑曲霉細(xì)胞深層發(fā)酵法生產(chǎn)內(nèi)切型菊粉酶。以牛蒡?yàn)槲ㄒ惶荚矗@ 得產(chǎn)菊粉酶菌株;通過測定發(fā)酵液酶活,從20株黑曲霉菌株篩選得到產(chǎn)菊粉酶活力最高的編號(hào)為08013的一株黑曲 霉菌株,酶活力為3.27U/mL。通過單因素試驗(yàn)對最佳發(fā)酵時(shí)間和不同的營養(yǎng)條件對黑曲霉產(chǎn)菊粉酶的影響進(jìn)行研 究。結(jié)果表明:最佳發(fā)酵時(shí)間為108h,最佳金屬離子為Na+,質(zhì)量濃度為0.5g/100mL;最佳碳源為牛蒡汁,體積分 數(shù)為10%;最佳有機(jī)氮源為酵母膏,質(zhì)量濃度為2g/100mL;最佳無機(jī)氮源為(NH4)2HPO4,質(zhì)量濃度為2g/100mL。 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)對內(nèi)切型菊粉酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵培養(yǎng)基配方中的牛蒡汁體 積分?jǐn)?shù)、酵母膏和(NH4)2HPO4的質(zhì)量濃度進(jìn)行定量研究,建立并分析各因素與酶活關(guān)系的數(shù)學(xué)模型。得到培養(yǎng)基最 優(yōu)配方為牛蒡汁9.98%、酵母膏1.74g/100mL、(NH4)2HPO4 1.82g/100mL時(shí),此時(shí)菊粉酶酶活力最高,為7.23U/mL。 經(jīng)驗(yàn)證,在此條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),測得菊粉酶酶活力為7.26U/mL,與理論計(jì)算值7.23U/mL基本一致。說明回歸模型 能較好地預(yù)測菊粉酶酶活。通過對發(fā)酵培養(yǎng)基的優(yōu)化,使最終酶活比初始酶活力(3.27U/mL)提高了122%。
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