為研究活的非可培養(yǎng)狀態(tài)(viable but nonculturable state,VBNC)的Escherichia coli O157:H7的復(fù)蘇能力,將E.coli O157:H7分別置于LB液體培養(yǎng)基和生理鹽水在-18℃低溫條件下誘導(dǎo)生產(chǎn)活的非可培養(yǎng)狀態(tài)E.coli。結(jié)合吖啶橙熒光顯微鏡計(jì)數(shù)法、活菌直接計(jì)數(shù)法和平板計(jì)數(shù)法對(duì)樣本細(xì)菌檢測(cè)驗(yàn)證,分別在第15天和第18天得到VBNC樣本。采用將培養(yǎng)液直接升溫到37℃、加入體積分?jǐn)?shù)為25%酵母浸膏(25℃)和加入體積分?jǐn)?shù)為8%吐溫-80(37℃)3種方法進(jìn)行復(fù)蘇研究。同時(shí)利用熒光定量PCR技術(shù)監(jiān)測(cè)從誘導(dǎo)到復(fù)蘇整個(gè)過(guò)程中的菌數(shù)變化。結(jié)果顯示:3種方法均能使VBNC狀態(tài)E.coli O157:H7在2d內(nèi)復(fù)蘇,復(fù)蘇后菌株與正常菌株形態(tài)類似;細(xì)菌進(jìn)入VBNC狀態(tài)15d后,采用相同的方法則無(wú)法復(fù)蘇。
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