領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：探討重組畢赤酵母葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)的分離純化過(guò)程及其性質(zhì)。方法：搖瓶發(fā)酵得到的粗酶液經(jīng)Q-Sepharose Fast Flow層析純化，用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)和變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDSPAGE)確定其分子質(zhì)量，用紫外和熒光分光光度計(jì)研究其光譜特征。結(jié)果：獲得GOD的純品，酶的純化倍數(shù)為1.35倍，酶活回收率為92.7%，天然分子質(zhì)量為150kD，亞基分子質(zhì)量為75kD；酶活力在pH5.0～8.0和55℃以下穩(wěn)定，最適pH值為6.0，最適溫度為40℃；以葡萄糖為底物的酶學(xué)動(dòng)力學(xué)常數(shù)Km值為21.06mmol/L；Hg2+、Ag+、Cu2+、Fe2+對(duì)其有強(qiáng)烈的抑制作用；該酶在275nm波長(zhǎng)處有最大紫外光吸收，在344nm波長(zhǎng)處有最大熒光吸收峰；液體狀態(tài)下該酶在4℃條件下放置6個(gè)月活性沒(méi)有損失，常溫下可保存3～5d。結(jié)論：重組畢赤酵母葡萄糖氧化酶純化成本低，收率高，有利于大規(guī)模純化，得到的純品穩(wěn)定性好，具有較高的利用價(jià)值。
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