目的:以采后黃冠梨為試材,系統(tǒng)研究梨果實(shí)在貯藏期間檸檬酸代謝調(diào)控機(jī)制,以及不同處理對(duì)檸檬酸代謝酶和基因表達(dá)特性的影響。方法:采用氯化鈣和殼聚糖涂膜處理梨果實(shí),利用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定果皮和果肉中檸檬酸含量的變化,同時(shí)測(cè)定在貯藏期內(nèi)檸檬酸合酶(citrate synthase,CS),細(xì)胞質(zhì)烏頭酸酶(cytoplasmic aconitase,cyt-ACO)以及異檸檬酸脫氫酶(NAD-isocitrate dehydrogenase,NADP-IDH)活性變化,通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析檸檬酸代謝酶基因的相對(duì)表達(dá)水平,并對(duì)三者進(jìn)行顯著性和相關(guān)性分析。結(jié)果:氯化鈣和殼聚糖涂膜處理黃冠梨果實(shí)可以有效地延緩檸檬酸的降解(P<0.05)以及改善代謝酶的活性(P<0.05),兩種處理在一定程度上影響了檸檬酸代謝酶基因的表達(dá)。檸檬酸合酶(CS)對(duì)檸檬酸的積累有顯著的正相關(guān)性(P<0.05),cyt-ACO與果肉中的檸檬酸代謝呈顯著正相關(guān)性,對(duì)果皮中檸檬酸呈現(xiàn)負(fù)相關(guān),而NADP-IDH對(duì)檸檬酸代謝影響很小。基因表達(dá)特性與相應(yīng)酶活變化呈一致性,從而調(diào)控檸檬酸代謝。因此,采后黃冠梨果實(shí)檸檬酸的代謝受到酶活以及基因水平的共同調(diào)控,氯化鈣和殼聚糖涂膜處理在一定程度上影響酶的活性以及基因的表達(dá)水平。
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