為明確α-淀粉酶和糖化酶協(xié)同水解小麥淀粉制備微孔淀粉的動(dòng)力學(xué)特征,以小麥A淀粉為材料,系統(tǒng)地分析pH值、反應(yīng)溫度、α-淀粉酶及糖化酶用量對(duì)水解速率的影響,并確定α-淀粉酶、糖化酶單一酶的米氏常數(shù)以及雙酶協(xié)同效應(yīng)。結(jié)果表明:在單一水解體系中,α-淀粉酶和糖化酶對(duì)小麥A淀粉的降解均遵循Michaelis-Menten方程,α-淀粉酶的米氏常數(shù)Km為9.548mg/mL,最大反應(yīng)初速率(Vmax)為0.659mg/(mL·min),糖化酶以淀粉為底物的米氏常數(shù)(Km)為12.676mg/mL,最大反應(yīng)初速率(Vmax)為0.555mg/(mL·min)。水解產(chǎn)物葡萄糖對(duì)反應(yīng)體系具有競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的作用,其抑制常數(shù)(Ki)為4.288mg/mL。在小麥A淀粉質(zhì)量濃度為5mg/mL、α-淀粉酶10U/mL、糖化酶20U/mL、反應(yīng)溫度55℃、pH4.5、水解時(shí)間為25min的條件下,可達(dá)到淀粉的水解極限即還原糖生成質(zhì)量濃度為2.54mg/mL。α-淀粉酶和糖化酶可協(xié)同水解小麥A淀粉制備微孔淀粉,雙酶協(xié)同作用的水解效率明顯高于單酶的水解效率。
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