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雙向電泳分析宣威火腿蛋白質(zhì)組方法的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 144 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 廖國(guó)周,王桂瑛,程志斌,施忠芬,曹錦軒,*
關(guān)鍵詞: 宣威火腿|蛋白質(zhì)組學(xué)|雙向電泳
摘要:

以宣威火腿為對(duì)象,采用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取宣威火腿肌肉蛋白,對(duì)蛋白定量后,進(jìn)行一向等電聚焦電泳和二向聚丙烯酰胺凝膠電泳,電泳后的凝膠以考馬斯亮藍(lán)染色,ImageMaster 2D Platinum軟件分析凝膠上的蛋白質(zhì)點(diǎn),切取1個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn),經(jīng)胰蛋白酶消化后使用基質(zhì)輔助激光解析電離-串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOF MS)獲取肽質(zhì)量指紋圖譜,并用Mascot軟件分析,以建立宣威火腿的蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法。結(jié)果表明:經(jīng)雙向電泳圖譜分析所獲得的宣威火腿蛋白點(diǎn)分布于pH4.0~7.0之間,共發(fā)現(xiàn)1749個(gè)蛋白點(diǎn),蛋白點(diǎn)清晰,圖譜分辨率較好;切取的蛋白質(zhì)點(diǎn)經(jīng)鑒定為Gamma-2-肌動(dòng)蛋白,Mascot檢索分值為129分(閾值為67分)。可見,成功建立雙向電泳分析宣威火腿蛋白質(zhì)組的方法。

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