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PMA-qPCR方法快速檢測(cè)活的E.coli O157:H7
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 李聰聰,余以剛,邱楊,李美玲,肖性龍,*,吳暉
關(guān)鍵詞: 疊氮溴化丙錠|定量PCR|活菌|檢測(cè)
摘要:

建立將疊氮溴化丙錠(PMA)與定量PCR(qPCR)技術(shù)結(jié)合,用于檢測(cè)熱滅活菌背景條件下的大腸桿菌活菌的方法。結(jié)果表明:5min以上的強(qiáng)烈光照可以使PMA與DNA共價(jià)交聯(lián),同時(shí)完全鈍化游離的PMA以避免“假陰性”結(jié)果;抑制死菌DNA擴(kuò)增的最低PMA質(zhì)量濃度為10μg/mL,不抑制活菌DNA擴(kuò)增的最高PMA質(zhì)量濃度為20μg/mL。當(dāng)活菌/總菌大于1%時(shí),經(jīng)PMA預(yù)處理,可以消除熱滅活菌DNA的干擾,實(shí)現(xiàn)對(duì)活菌的定量檢測(cè)。

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