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新型中性植酸酶在大腸桿菌中的高效表達(dá)、純化及酶學(xué)性質(zhì)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 133 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 路國偉,許偉,*,邵榮,云志
關(guān)鍵詞: 淀粉液化芽孢桿菌|高效表達(dá)|中性植酸酶|酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

運(yùn)用基因工程技術(shù),將克隆到的淀粉液化芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061新型中性植酸酶基因(GenBank登錄號(hào)為HM747163)構(gòu)建到表達(dá)載體pET22b(+)上,并在E. coli BL21(DE3)中進(jìn)行高效表達(dá)。電泳結(jié)果表明該酶分子質(zhì)量約為42kD,目的蛋白占大腸桿菌可溶性蛋白30%左右。利用Ni-NTA瓊脂糖凝膠進(jìn)行親和純化,酶學(xué)性質(zhì)研究表明,其最適溫度為60℃,最適pH值為7.0,最大酶比活力為15U/mg。60℃時(shí)以植酸鈉為底物的Km值為0.30mmol/L。

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