領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
研究擴(kuò)展青霉DNA的提取及其聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)檢測條件的優(yōu)化。分別采用玻璃珠法、氯化芐法、玻璃珠+氯化芐法提取擴(kuò)展青霉菌及對照菌株的基因組DNA，經(jīng)紫外測定和電泳檢測實(shí)驗(yàn)，分析提取DNA的質(zhì)量濃度和純度；同時(shí)，根據(jù)擴(kuò)展青霉多聚半乳糖醛酸酶基因內(nèi)一段保守序列設(shè)計(jì)合成一對288bp的擴(kuò)增引物，并對PCR檢測條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明：玻璃珠+氯化芐法提取到的DNA質(zhì)量濃度和純度較理想，擴(kuò)展青霉DNA可獲得良好的特異性擴(kuò)增，PCR擴(kuò)增的最適退火溫度為53～59℃，最適引物濃度為0.04～0.16μmol/L，最適模板質(zhì)量濃度為2.40～5.28μg/mL，dNTPs濃度對PCR擴(kuò)增影響不大。運(yùn)用實(shí)驗(yàn)所得優(yōu)化參數(shù)檢測擴(kuò)展青霉菌，整個(gè)過程僅需3～4h，和傳統(tǒng)的培養(yǎng)檢測法相比，該方法可有效提高檢測效率，可進(jìn)一步將該方法應(yīng)用于實(shí)踐。
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