
為建立一條制備酪蛋白磷酸肽(CPPs)的新工藝路線。采用酶解與超濾耦聯(lián)技術(shù)初步分離制備酪蛋白生物活性肽,然后通過(guò)樹(shù)脂層析將酪蛋白生物活性肽中的酪蛋白磷酸肽和非磷酸肽分離。選用堿性蛋白酶Alcalase在切向流酶膜反應(yīng)器中(膜截留分子質(zhì)量10kD)連續(xù)酶解3h、酶解溫度50℃、pH8.5。重點(diǎn)研究大孔弱堿性陰離子交換樹(shù)脂D303對(duì)酪蛋白生物活性肽的分離純化工藝,并采用單因素試驗(yàn)優(yōu)化CPPs的分離純化工藝參數(shù),確定D303樹(shù)脂的較佳動(dòng)態(tài)吸附解吸條件:上樣流速1BV/h、上樣量100mL、洗脫溫度45℃、洗脫酸濃度0.15mol/L HCl,獲得磷酸肽N/P比為7.21,P洗脫得率為93.11%。
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