選用常規(guī)發(fā)酵乳菌種,探討不同溶劑、不同濃度的羧基熒光素二醋酸酯(5-(6)-Carboxyfluorescein diacetate,5(6)-cFDA)標記乳酸菌細胞的影響因素。結果顯示:水、PBS 和二甲基亞砜(DMSO)配制的5(6)-cFDA 標記初期,細胞標記率分別為94.8%、95.2% 和99.77%,放置30d 后細胞標記效果分別下降到51.53%、55.6% 和96.7%;每毫升菌懸液加60μL 的5mg/mL 5(6)-cFDA(相當于終濃度為6.52 × 10-7mol/L),其熒光強度與5(6)-cFDA 濃度成正比,且標記效果最理想。實驗還證實了1 × 106~1 × 107cells/mL 是流式細胞儀檢測細胞活性較適合的濃度,且標記率較高;在pH7.0 的條件下對細胞活性和發(fā)光強度影響最小,其標記率達到98.3%。
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