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有機磷農(nóng)藥三唑磷單克隆抗體制備及鑒定
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 130 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 韋倩妮,黃魁英,雷紅濤 ,樊曉博,孫遠明,徐振林,王 弘,沈玉棟,徐懷德
關(guān)鍵詞: 三唑磷|單克隆抗體|酶聯(lián)免疫吸附檢測
摘要:

采用活潑酯法和混合酸酐法將三唑磷半抗原(TZPM-Hap)與牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶聯(lián),分別制備出一種免疫抗原(TZPM-A-BSA)和兩種包被抗原(TZPM-A-OVA 和TZPM-M-OVA)。通過免疫小鼠及細胞融合,并對雜交瘤細胞進行經(jīng)多次篩選和亞克隆得到1 株產(chǎn)三唑磷單克隆抗體陽性細胞株(FC3),其抗體亞類為IgM。辛酸- 硫酸銨沉淀法純化后的抗體經(jīng)間接ELISA 檢測,該方法IC50=9.7μg/L,最低檢測限(LOD)為1.0μg/L,定量檢測線性范圍(IC20~IC80)為2.5~100.0μg/L,與其他有機磷農(nóng)藥結(jié)構(gòu)類似物無明顯交叉反應(yīng),顯示出高度的特異性。該抗體可進一步用于免疫分析試劑盒開發(fā)。

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