研究茶樹菇與雞腿菇原生質(zhì)體制備、融合及再生。以菌齡4d 的菌絲體為原料,采用1% 果膠酶和1% 蝸牛酶混合酶液(體積比1:1),酶解4h,酶解溫度為30℃,pH6.0 的0.6mol/L 甘露醇溶液為滲透壓穩(wěn)定劑,制備得到茶樹菇與雞腿菇原生質(zhì)體。兩種原生質(zhì)體融合的最佳條件為:使用35% 聚乙二醇(PEG4000)和0.2mol/L CaCl2 溶液(pH10)為助融劑,30℃融合30min。利用滅活原生質(zhì)體作為標記篩選出融合子,融合的細胞在培養(yǎng)基中實現(xiàn)再生,通過菌落表型的比較和拮抗實驗驗證再生出的為融合子。
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