領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
采用木瓜蛋白酶和糜蛋白酶雙酶聯(lián)合水解壇紫菜蛋白（Porphyra haitanensis protein，PHP）制備降血壓活性肽，測(cè)定了經(jīng)超濾后各個(gè)分子質(zhì)量PHP酶解液清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基和2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）陽(yáng)離子自由基能力、鐵離子還原抗氧化能力（ferric ion reducing antioxidant power，F(xiàn)RAP）以及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensin converting enzyme，ACE）抑制活性。經(jīng)質(zhì)譜鑒定和活性肽數(shù)據(jù)庫(kù)BIOPEP以及AHTPDB網(wǎng)站查找篩選活性肽，采用分子對(duì)接解釋多肽抑制ACE機(jī)理，并對(duì)雙酶酶解PHP動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。結(jié)果表明：經(jīng)超濾后的8?個(gè)分子質(zhì)量的壇紫菜多肽組分中，＜0.5?kDa的組分具有最高DPPH自由基和ABTS陽(yáng)離子自由基清除能力，＜1?kDa的組分具有最高FRAP值，而0.5～1?kDa組分IC50值（（2.21±0.28）mg/mL）最低。經(jīng)查找篩選出14?條降血壓肽，其中4?條肽的序列和對(duì)接能量分別為AVP（－5.87?kJ/mol）、GPL（－6.13?kJ/mol）、LDY（－7.65?kJ/mol）和LGYL（－7.78?kJ/mol）。酶解動(dòng)力學(xué)模型預(yù)測(cè)PHP水解度與實(shí)驗(yàn)水解度相對(duì)誤差在10%以下。本實(shí)驗(yàn)基于串聯(lián)質(zhì)譜與分子對(duì)接技術(shù)，通過(guò)生物信息篩選和體外活性檢測(cè)從混合多肽中快速鑒定、篩選活性多肽，探究多肽抑制ACE的機(jī)理，并建立了描述蛋白可控酶解過(guò)程規(guī)律的動(dòng)力學(xué)模型，為活性肽的制備提供了參考和借鑒。
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