領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
建立對沙門氏菌的G-四聯(lián)體與聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）聯(lián)用可視化檢測方法。以沙門氏菌屬特異性基因invH為檢測目標(biāo)，設(shè)計5’端含有G-四聯(lián)體互補序列的上下游引物，通過PCR的特異性識別并擴增目標(biāo)序列，獲得大量含G-四聯(lián)體的雙鏈DNA，變性后與氯高鐵血紅素結(jié)合生成具有過氧化物酶活性的模擬酶（DNAzyme），并催化H2O2與2,2’-聯(lián)氮-雙(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺鹽由無色變?yōu)榫G色，實現(xiàn)G-四聯(lián)體與PCR聯(lián)用對沙門氏菌的可視化檢測。在優(yōu)化的檢測體系下，沙門氏菌基因組的質(zhì)量濃度對數(shù)與421 nm處的吸光度具有良好的線性關(guān)系，其回歸方程為y=0.129 9x＋0.217 9，R2=0.994 5，線性范圍0.07～771.6 ng/μL，靈敏度為0.07 ng/μL。特異性分析表明：此方法適用于沙門氏菌屬的檢測，可成功應(yīng)用于人工污染沙門氏菌牛奶的檢測，檢出限為1.2×102 CFU/mL。通過檢測30 種市售樣品，發(fā)現(xiàn)其結(jié)果與國標(biāo)檢測方法結(jié)果一致。本研究為食源性致病菌的檢測提供了新的策略。
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