為探究pH值對咖啡酸β-苯乙醇酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)與人血清蛋白(human serum albumin,HSA)相互作用的影響,采用熒光發(fā)射光譜和同步熒光光譜研究在不同pH值(3.0、5.0、7.4)條件下CAPE對HSA的熒光猝滅作用,并計(jì)算猝滅常數(shù)、結(jié)合常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù),分析熒光猝滅機(jī)理,最后通過位點(diǎn)Marker實(shí)驗(yàn)確定結(jié)合位點(diǎn)。熒光發(fā)射光譜表明,不同pH值條件下CAPE對HSA內(nèi)源熒光均產(chǎn)生了猝滅作用,生理pH 7.4時(shí)猝滅率最高,結(jié)合常數(shù)最大;熱力學(xué)參數(shù)表明CAPE與HSA主要通過范德華力和氫鍵作用結(jié)合;同步熒光表明CAPE和pH值的共同影響改變了HSA的構(gòu)象;位點(diǎn)Marker實(shí)驗(yàn)表明,CAPE與HSA的結(jié)合位點(diǎn)位于Sudlow’s site I附近。結(jié)果表明,pH值的增加促進(jìn)了CAPE與HSA的結(jié)合,這將為CAPE活性穩(wěn)態(tài)化保持、靶向遞送提供理論依據(jù)。
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