基于活菌親和吸附法篩選的乳源蛋白抗菌肽BCp12具有廣譜的抗菌效果,但其抑菌機制尚不清楚。本研究利用紫外吸收光譜、流式細胞儀、傅里葉變換紅外光譜、掃描電子顯微鏡及透射電子顯微鏡等技術(shù)探究抗菌肽BCp12對大腸桿菌壁膜的損傷作用,并通過凝膠阻滯和熒光光譜實驗研究BCp12與菌體DNA的結(jié)合作用及方式。結(jié)果表明:質(zhì)量濃度2 mg/mL的BCp12可引起大腸桿菌壁膜親水性增加,菌體細胞吸附率下降至64.73%,對菌體壁膜脂肪酸、蛋白、多肽酰胺、多糖及指紋信息區(qū)都有明顯影響,菌體細胞膜損傷顯著(損傷率為25.1%),且細胞內(nèi)紫外吸收物質(zhì)泄漏,菌體形態(tài)變得粗糙皺縮,細胞質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)遭到嚴重破壞并出現(xiàn)空化現(xiàn)象;BCp12能夠與溴化乙錠相互競爭結(jié)合位點,并以嵌入方式結(jié)合DNA,產(chǎn)生凝膠阻滯現(xiàn)象,影響DNA的正常復(fù)制,進而抑制菌體的生長繁殖。本研究部分揭示了BCp12的抗菌機理。
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