應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法優(yōu)化了B.sustilis CNMC-0014中性蛋白酶產(chǎn)生的培養(yǎng)基組分。單因素試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),在測試的6種碳源中,以甘油和玉米粉對(duì)產(chǎn)酶影響顯著,酶活力分別達(dá)到了3955.16±2.15U/ml和3939.15±1.87U/ml。氮源試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),大豆粉對(duì)產(chǎn)酶影響最為顯著,酶活力達(dá)到4318.12±5.66U/ml。通過極差分析與正交分析優(yōu)化了培養(yǎng)基配比,優(yōu)化方案為:2%玉米粉,1%甘油,3%玉米粉和3%麩皮。方差分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),甘油和玉米粉對(duì)產(chǎn)酶影響顯著(p<0.05),大豆粉對(duì)產(chǎn)酶極顯著(p<0.01),麩皮對(duì)產(chǎn)酶影響不顯著(p>0.05)。同時(shí),還研究了金屬離子、溶氧、起始pH值、菌齡以及接種量對(duì)產(chǎn)酶的影響,研究結(jié)果表明,Ca2+、Mg2+、Na+、Zn+、Mn2+可以在不同程度對(duì)產(chǎn)酶有激活作用,特別是Ca2+,酶活力達(dá)到了4552.97U/ml,而Fe3+、Fe2+、K+、Ag+對(duì)產(chǎn)酶有強(qiáng)烈的抑制作用,特別是Ag+(酶活力僅為987.46U/ml),最適搖瓶裝量為50ml/300ml,最佳起始pH值為7.5,最佳菌齡與接種量分別為24h和3%。
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