以假單胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138為供試菌株,運(yùn)用響應(yīng)面法對(duì)酶法合成L-半胱氨酸所用酶的生產(chǎn)條件進(jìn)行優(yōu)化。首先利用Plackett-Burman設(shè)計(jì)從影響TS1138菌株產(chǎn)酶的眾多因素中篩選出影響較大的四個(gè)因素:DL-ATC 、玉米漿、轉(zhuǎn)速和裝液量。在此基礎(chǔ)上再利用二次響應(yīng)面分析法進(jìn)行優(yōu)化,得出了最佳的實(shí)驗(yàn)條件。最佳產(chǎn)酶培養(yǎng)基配方為(g/L):葡萄糖 30、DL-ATC·3H2O 3.0、玉米漿 3.1、尿素 3、MnSO4·H2O 1、K2HPO4·3H2O 3、FeSO4·7H2O 0.01、MgSO4·7H2O 0.5、NaCl 3;最佳產(chǎn)酶培養(yǎng)條件為:搖床轉(zhuǎn)速 190r/min、500ml搖瓶裝液量 42ml、接種量 10%、產(chǎn)酶培養(yǎng)基初始 pH7.5、培養(yǎng)溫度 29℃。在優(yōu)化條件下進(jìn)行產(chǎn)酶培養(yǎng),細(xì)胞酶活力達(dá) 2255U/ml,比未優(yōu)化前的 2053U/ml 提高了 9.8%。
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