乳酸菌NICE系統(tǒng)的兩組分食品級(jí)選擇標(biāo)記具有顯性和互補(bǔ)選擇標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)。含紅霉素抗性選擇標(biāo)記的復(fù)制子缺失的伴生型質(zhì)粒是依賴復(fù)制子完全且無選擇標(biāo)記的食品級(jí)克隆載體而復(fù)制的。構(gòu)建的伴生型質(zhì)粒的Emr和rep分別來源于pMG36e和pRAF800,經(jīng)酶切、缺刻、補(bǔ)平和連接得到只能在紅霉素選擇壓力下與θ型復(fù)制子的克隆載體共存的復(fù)制子缺失伴生型質(zhì)粒。
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