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蜜蜂α-葡萄糖苷酶的分離純化及其酶學(xué)性質(zhì)研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 125 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 王志江, 魏紅福
關(guān)鍵詞: 蜜蜂; α-葡萄糖苷酶; 純化; 穩(wěn)定性; 動力學(xué);
摘要:

本研究以蜜蜂腹部為材料,通過研磨進(jìn)行組織破碎,然后硫酸銨沉淀、High Q離子交換層析、疏水作用層析和Superdex G-75凝膠層析,得到的α-葡萄糖苷酶在SDS-PAGE上呈單一蛋白質(zhì)條帶,分子量約為55kDa。以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)為底物,研究酶催化反應(yīng)動力學(xué),結(jié)果表明:α-葡萄糖苷酶的最適反應(yīng)pH范圍為5.0~6.0,而pH穩(wěn)定性范圍為5.0~10.0。該α-葡萄糖苷酶的熱穩(wěn)定性比較差。其最適反應(yīng)溫度范圍在35~45℃內(nèi)。Zn2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+對α-葡萄糖苷酶有激活作用。而Cu2+和Co2+對α-葡萄糖苷酶有抑制作用。酶動力學(xué)參數(shù)Km和Vmax分別為0.183mmol/L和0.085μmol/min·mg。

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