采用高通量測序技術(shù)結(jié)合網(wǎng)絡(luò)分析及多元統(tǒng)計分析方法,研究退化窖池窖壁上層(PW-T)、中層(PW-M)、下層(PW-U)及窖底(PB)窖泥中原核微生物群落、菌群網(wǎng)絡(luò)及影響微生物群落的理化因素。結(jié)果表明,窖泥微生物群落α及β多樣性在退化窖池中均存在明顯的空間異質(zhì)性,且窖池退化是一個自上而下的退化過程。隨窖池深度增加,窖泥微生物群落α多樣性指數(shù)整體呈顯著上升趨勢,如Shannon指數(shù)由大到小依次為PW-U(3.38)>PB(2.51)>PW-M(1.09)>PW-T(0.33)(P<0.05);窖泥優(yōu)勢菌門由單一的厚壁菌門(Firmicutes)(PW-T和PW-M,約99%)增加至Firmicutes、擬桿菌門(Bacteroidetes)、廣古菌門(Euryarchaeota)等6 個門(PW-U)及PB的4 個門。退化窖泥呈現(xiàn)低含水量(平均值32.7%)、低pH值(平均值4.42)及低有效磷(平均值259.27 mg/kg)“三低”的理化特征,其對窖泥微生物群落結(jié)構(gòu)影響較大(冗余分析)。窖泥菌群網(wǎng)絡(luò)中互呈正相關(guān)的微生物主要隸屬于不同的綱(占總相關(guān)性的78.74%)。同現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)中9 個樞紐總含量非常低(0%~2.84%),與窖泥pH值或含水量呈顯著或極顯著正相關(guān)(P<0.05或P<0.01);除互營單胞菌屬(Syntrophomonas)外,其他樞紐均與乳酸桿菌屬(Lactobacillus)呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。窖泥pH值與多種理化因子呈顯著正、負(fù)相關(guān)(P<0.05),且與群落Simpson指數(shù)呈顯著正相關(guān),表明pH值可作為一個綜合指標(biāo)用于窖泥質(zhì)量的初步判斷。本實驗較系統(tǒng)地研究了窖泥原核微生物群落多樣性在退化窖池中空間分布、微生物之間以及微生物和理化因子之間的相關(guān)性,為進一步揭示窖泥的退化機制、防治窖泥退化及人工優(yōu)質(zhì)窖泥的制作提供一定的理論支撐。
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