本研究旨在探討原花青素B2(procyanidin B2,PCB2)對人乳腺癌MCF-7細胞的抗腫瘤作用及其機制。采用噻唑藍法分析PCB2在不同濃度和不同處理時間下對MCF-7細胞存活率的影響;通過激光共聚焦顯微鏡檢測細胞內Ca2+濃度變化并觀察Hoechst 33342染色后的細胞凋亡形態(tài);采用流式細胞分析儀檢測PCB2對MCF-7細胞凋亡率、周期、胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平及線粒體膜電位變化的影響;通過Western blot檢測PCB2對MCF-7細胞凋亡相關蛋白表達量的影響。結果表明,當濃度在10~80 μmol/L范圍內時,PCB2能顯著降低MCF-7細胞的存活率(P<0.05),且呈濃度依賴性,處理24、48、72 h時對MCF-7細胞存活率的半抑制濃度分別為114.82、57.15 μmol/L和55.64 μmol/L。PCB2能顯著增加MCF-7細胞凋亡率、胞內ROS水平(P<0.05)、細胞核熒光強度,并破壞Ca2+平衡,同時顯著降低線粒體膜電位(P<0.05),并將細胞周期阻滯在G0/G1期進而誘導細胞凋亡。PCB2可上調Bax、細胞色素c、Caspase-12和Caspase-3蛋白的相對表達水平,下調Bcl-2蛋白相對表達水平。綜上可知,PCB2具有抗腫瘤作用,其機制與激活線粒體和內質網介導的凋亡通路、周期阻滯和細胞內ROS水平增加有關。
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