建立一種新型的西布曲明半定量檢測(cè)方法。通過在檢測(cè)試紙條上設(shè)置4?條包被有抗原的檢測(cè)線,和被測(cè)抗原反應(yīng)后的剩余標(biāo)記抗體與包被抗原的反應(yīng)濃度可梯度降低,實(shí)現(xiàn)在單一試紙條構(gòu)建多級(jí)靈敏度的免疫反應(yīng),從而建立基于波長470?nm手電筒作為激發(fā)光源、肉眼讀取結(jié)果的西布曲明熒光微球競(jìng)爭(zhēng)免疫層析半定量檢測(cè)方法。對(duì)吐溫-20表面活性劑含量、標(biāo)記抗體量、包被抗原質(zhì)量濃度、硝酸纖維膜類型和層析反應(yīng)時(shí)間等參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化,通過試紙條上顯色條帶的數(shù)量對(duì)西布曲明進(jìn)行半定量。結(jié)果顯示,在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,該檢測(cè)方法檢出限為0.05?μg/mL,檢測(cè)范圍為0~9.00?μg/mL。該方法無需使用專門的檢測(cè)儀器,可在15?min內(nèi)完成檢測(cè),其結(jié)果與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)結(jié)果一致。該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、結(jié)果可靠,可用于保健食品中西布曲明非法添加物的定性和半定量篩查分析。
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