為克服酶聯(lián)免疫吸附法無法檢測羊乳中摻加的經(jīng)過熱處理的牛乳的局限,本研究首先通過氣相色譜-質(zhì)譜法發(fā)現(xiàn)牛乳區(qū)別于山羊乳的關(guān)鍵非蛋白生物標志物為N-乙酰氨基葡萄糖,然后基于該標志物開發(fā)基于高效液相色譜手段定量檢測山羊乳中摻加的牛乳的方法。樣品在70?℃經(jīng)1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生60?min后,在高效液相色譜儀上使用反相C18色譜柱對目標物進行分離,在245?nm紫外波長下對其進行檢測,根據(jù)N-乙酰氨基葡萄糖含量推算山羊乳中摻加的牛乳量。該方法的牛乳摻加量檢出限和定量限分別為0.3%和1.0%,在1%~100%的牛乳摻加范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)為0.999?4,該方法的加標回收率為100.4%~105.1%,在10、50?mg/L和100?mg/L加標質(zhì)量濃度下,日內(nèi)和日間精密度分別為1.8%和2.0%、1.7%和3.7%、2.6%和2.7%。該方法具有較高的靈敏度、準確度和精密度,可用于山羊乳中摻加牛乳的定量分析。
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