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基因工程菌1020耐熱木聚糖酶的純化與性質(zhì)
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 151 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 孫雷, 朱孝霖, 李環(huán), 姚忠, 韋萍
關(guān)鍵詞: 耐熱木聚糖酶; 熱變性; Ni-NTA; 分離純化; 性質(zhì);
摘要:

通過(guò)熱變性處理和Ni-NTA層析分離純化基因工程菌1020耐熱木聚糖酶。對(duì)熱變性條件優(yōu)化,70℃處理30min效果,純化倍數(shù)4.9;利用木聚糖酶C端6個(gè)His標(biāo)記對(duì)Ni-NTA瓊脂糖凝膠的結(jié)合性,一步層析得到電泳純的木聚糖酶。酶的最適反應(yīng)溫度為110℃,具有高度耐熱性,在70℃保溫8h,酶活基本不變,100℃保溫5h后,酶活殘余40%;在pH6.0~10.0范圍內(nèi)都有較高的酶活性和穩(wěn)定性。低濃度的異丙醇對(duì)酶反應(yīng)有促進(jìn)作用,Hg2+對(duì)酶反應(yīng)有強(qiáng)抑制作用。該酶對(duì)燕麥木聚糖的Km為0.55mg/ml,Vmax=14.26μmol/min·mg。

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