熒光假單胞菌是導(dǎo)致冷藏食品腐敗變質(zhì)常見的嗜冷菌,抑制熒光假單胞菌的生長繁殖對延長冷藏食品貨架期和提高食品安全性具有重要意義。本實驗通過測定最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)和時間-抑菌曲線考察苯乳酸對熒光假單胞菌的抑菌活性,從細(xì)胞膜電勢、細(xì)胞膜滲透性和完整性、細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)表達(dá)和DNA結(jié)構(gòu)等方面研究苯乳酸對熒光假單胞菌的抑菌機(jī)制。結(jié)果表明:苯乳酸對熒光假單胞菌的MIC為1.25 mg/mL;苯乳酸可導(dǎo)致細(xì)胞膜電勢消散,且消散程度呈劑量依賴性;苯乳酸可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鉀離子顯著泄漏(P<0.05),增加細(xì)胞膜的滲透性;MIC苯乳酸處理菌體0.5 h后,流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果顯示,碘化丙啶沾染率為57.6%,掃描電子顯微鏡結(jié)果顯示,部分菌體破裂,表明苯乳酸可以破壞細(xì)胞膜完整性;十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果表明苯乳酸對蛋白質(zhì)表達(dá)無明顯影響;凝膠阻滯電泳與熒光光譜結(jié)果顯示苯乳酸可以破壞DNA結(jié)構(gòu)。結(jié)論:苯乳酸可以通過損傷細(xì)胞膜和破壞DNA發(fā)揮雙靶位抑菌作用,苯乳酸對熒光假單胞菌抑菌機(jī)制的闡釋結(jié)果可為冷藏食品中嗜冷菌的控制以及苯乳酸在食品中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
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