黏質(zhì)沙雷菌plaS基因編碼的磷脂酶A1輔助蛋白S(phospholipase A1 accessory protein S,PlaS)能夠顯著提高磷脂酶A1在大腸桿菌中的表達活性,但對宿主菌的生長具有抑制作用,且抑制機制尚無相關(guān)研究報道。本實驗通過對PlaS進行生物信息學(xué)分析并對其N端截短系列表達菌株的生長特性進行研究以確定其抑制作用關(guān)鍵區(qū)域,并通過掃描電子顯微鏡觀察和流式細胞儀檢測來初步探究PlaS對表達宿主菌的抑制機理。結(jié)果表明,在PlaS N端分別截短前23、24、25、26、27 個氨基酸構(gòu)建的表達菌株中,dS23P28、dS24P28、dS25P28、dS26P28菌株仍表現(xiàn)出不同程度的生長抑制現(xiàn)象,而dS27P28菌株沒有出現(xiàn)生長抑制現(xiàn)象,初步表明PlaS N端的前27 個氨基酸為抑制關(guān)鍵區(qū)域。掃描電子顯微鏡和流式細胞儀結(jié)果顯示,PlaS的表達對大腸桿菌的細胞膜有嚴重的破壞作用,而N端截短前27 個氨基酸的PlaS表達后對大腸桿菌細胞膜的損傷作用消失,這一結(jié)果也與生長特性結(jié)果一致。本實驗結(jié)果可為深入研究黏質(zhì)沙雷菌PlaS功能提供理論參考。
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