領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為研究解淀粉芽孢桿菌素Amylocyclicin W5的抑菌機(jī)理，本實(shí)驗(yàn)通過硫酸銨沉淀、離子交換以及?KTA蛋白純化系統(tǒng)對(duì)Amylocyclicin W5進(jìn)行分離純化，并對(duì)Amylocyclicin W5進(jìn)行三羥甲基甘氨酸-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳；此外，以蠟樣芽孢桿菌（Bacillus cereus LMGT2805）為指示菌對(duì)Amylocyclicin W5進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，同時(shí)通過掃描電子顯微鏡、透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化以及細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)變化。結(jié)果表明，最適宜沉淀細(xì)菌素的硫酸銨飽和度為70%，0.5 mol/L NaCl可以明顯洗脫吸附在HiPrep SP XL 16/10柱上的Amylocyclicin W5，將洗脫液通過?KTA蛋白純化系統(tǒng)得到2 個(gè)對(duì)應(yīng)的收集峰（F1和F2）；對(duì)不同收集峰對(duì)應(yīng)的洗脫液進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有F2對(duì)應(yīng)的組分液對(duì)B. cereus LMGT2805有抑菌效果。三羥甲基甘氨酸-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示Amylocyclicin W5組分F2的分子質(zhì)量約為12.3 kDa。高濃度（4 倍最低半抑菌濃度）條件下的Amylocyclicin W5可以完全抑制B. cereus LMGT2805，其主要抑菌機(jī)制是破壞其細(xì)胞壁，使其形成孔洞，導(dǎo)致其內(nèi)容物外泄，細(xì)菌（營(yíng)養(yǎng)或芽孢細(xì)菌）無法正常進(jìn)行代謝，從而造成細(xì)菌的死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)論為新型廣譜細(xì)菌素的開發(fā)利用及其在食品安全領(lǐng)域的應(yīng)用研究提供了數(shù)據(jù)支持。
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