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β-Casomorphin-7的酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)方法的建立
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 166 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 張源淑, 鐘海濤, 鄒思湘, 陳偉華
關(guān)鍵詞: β-Casomorphin-7|ELISA|多克隆抗體|
摘要:

β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一個有代表性的乳源外啡肽,有調(diào)節(jié)動物消化道運動和采食、內(nèi)分泌、免疫等多種生物學功能。本研究以β-Casomorphin-7與人血清白蛋白(HSA)經(jīng)戊二醛交聯(lián)的復合物作為包被抗原;一抗為雞抗β-Casomorphin-7與牛血清白蛋白(BSA)交聯(lián)復合物的抗血清;酶標二抗為兔抗雞IgG經(jīng)戊二醛與辣根過氧化物酶(HRP)交聯(lián)的復合物。包被抗原和一抗的稀釋度經(jīng)方陣稀釋實驗確定。本實驗所建立的競爭ELISA方法的孔間差異為3.3%,板間差異為8.6%,檢測靈敏度20ng/ml,檢測范圍20~320ng/ml,在實驗濃度范圍內(nèi)。β-Casomor-phin-7的抗血清與β-內(nèi)啡肽、腦啡肽、強啡肽、精氨酸降壓素和神經(jīng)降壓素等活性肽未顯示免疫交叉反應(yīng)。表明所建立的方法有較高的特異性,可用于酪啡肽的體內(nèi)功能研究。

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